在成骨性成骨肉瘤的病例，有時可以在早期發現血液中骨源性堿性磷酸酶增高，這與該腫瘤大量的成骨作用有關?；铙w組織檢查：成骨肉瘤的診斷雖然根據臨床和放射學檢查可以明確，但病理診斷往往是治療的必備依據。當診斷考慮到該腫瘤的可能時，及時的施行活體組織檢查，盡快得到病理學檢查的確認，對明確診斷和治療的安排有著極其重要的意義。
1.X線攝片
典型的成骨肉瘤X線表現為腫瘤性骨組織同時具有新骨生成和骨破壞的特點。腫瘤多位于長管狀骨的干骺端，邊緣不清，骨小梁破壞，腫瘤組織密度增高，穿破骨皮質后腫瘤進一步將骨膜頂起，產生該病具有特征性的X線征象——考德曼套袖狀三角(“Codman-三角”)，雖然這種現象在部分骨髓炎和尤文肉瘤病人中也可見到，但在成骨肉瘤中則是非常典型的。晚期病例，可以看到腫瘤浸潤軟組織的陰影，也可在部分病例中見到病理骨折現象。
2.CT掃描和MRI檢查
是判斷骨腫瘤性質、范圍和有無周圍軟組織浸潤的有效手段，也可以早期發現肺部和其他臟器的轉移病灶，是成骨肉瘤臨床檢查的常規項目。
3.核素骨掃描
可以發現和鑒別成骨作用的存在，是早期發現和晚期鑒別有否轉移病灶的常用方法。