對皮損刮片做Tzanck試驗，可檢出HSV感染特征的巨細胞包函體，但不能區別HSV感染或水痘-帶狀皰疹病毒感染，敏感性僅為病毒分離的60%。
一、抗體檢測法：抗體檢測，目前最廣泛的是hsv-2抗體檢測，如蛋白印跡法也可用gd2作抗原檢測hsv-2抗體，具有敏感性，且能區分hsv-1和hsv-2的優點。
二、血清學檢查：主要用于檢測抗hsv-1和抗hsv-2抗體，診斷hsv的原發性感染，進行hsv感染的血清流行病學調查。可采用免疫熒光試驗、酶聯免疫吸附試驗、免疫印跡試驗和放射免疫試驗等法檢測。
三、電鏡檢查：取水皰液或病變腦組織制片，在電鏡下觀察病毒顆粒，陽性率為50%，但hsv與其他皰疹病毒在形態上難以區分。免疫電鏡檢查較為特異。
四、細胞學檢查：從皰底或潰瘍面刮取少量組織作涂片，wright-giemsa染色或papanicolaou染色，可檢出hsv感染具特征性的多核巨細胞內的嗜酸性包涵體。
五、細胞培養法：從水皰底部取材做組織培養分離病毒，為目前最敏感、最特異的檢查方法，需時5天-10天。因其技術條件要求高，價格昂貴，目前尚不能普遍使用。
六、抗原檢測法：如pcr檢測皮損hsv的dna，敏感性和特異性高，能大大提高生殖器潰瘍病人中hsv確診的能力，但費用昂貴，且受操作技術和實驗室條件及設備的影響，容易出現假陽性，故用于臨床診斷其準確性受影響。